| 학회 | 한국공업화학회 |
| 학술대회 | 2022년 봄 (05/11 ~ 05/13, 제주국제컨벤션센터(ICC JEJU)) |
| 권호 | 26권 1호 |
| 발표분야 | 포스터-생물공학 |
| 제목 | 다양한 DNA 변형 효소에 대한 반응으로 crRNA를 조작하여 Cas12a trans-cleavage 활성 조절 |
| 초록 | CRISPR(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats)/Cas 시스템은 생물학 분야에서 많은 관심을 받고 있으며 게놈 편집, 유전자 발현 조절, 세포 이미징 및 분자 진단에 활용되고 있다. 특히, 표적 DNA를 인식한 후 단일 가닥 DNA를 무차별적으로 절단하는 Cas12a의 trans-cleavage 활성은 생체 분자 검출에 널리 이용되고 있다. 본 연구는 3'-말단에 11-mer DNA 확장을 갖는 CRISPR RNA(crRNA)가 DNA 확장이 없거나 30-mer 또는 더 긴 DNA 확장을 갖는 crRNA보다 Cas12a의 더 높은 trans-cleavage 활성을 유발함을 확인한 후, 다양한 DNA 변형 효소에 대한 반응으로 Cas12a의 trans-cleavage 활성을 조사하였다. 그 결과, 우리는 restriction enzyme, exonuclease 또는 terminal transferase와 같은 특정 효소의 존재에서만 Cas12a의 trans-cleavage 활성이 증가하거나 감소함을 입증하였다. 이러한 결과를 통해, 발명된 기술은 원하는 시점에서 Cas12a 의 trans-cleavage 활동을 개시하는 시스템의 기초가 될 뿐만 아니라 다양한 신호 전달 방법과 결합되어 새로운 검출 시스템에 적용될 수 있다. |
| 저자 | 한진주, 박기수 |
| 소속 | 건국대 |
| 키워드 | CRISPR/Cas; crRNA; DNA modifying enzyme |
