| 학회 |
한국화학공학회 |
| 학술대회 |
2002년 가을 (10/24 ~ 10/26, 서울대학교) |
| 권호 |
8권 2호, p.4045 |
| 발표분야 |
생물화공 |
| 제목 |
대장균에서 생산된 항 에이파토시스 재조합 30K 단백질의 정제 |
| 초록 |
Apoptosis 억제 효과가 있는 5령 누에의 체액 성분인 30K 단백질 유전자를 대장균에서 과발현 시키기 위해 발현 벡터인 pET22b(+)에 cloning하였으며 IPTG 유도에 의해 발현시킨 결과 Inclusion body 형태를 보였다. 벡터의 특성상 재조합 단백질 말단에 Histidine이 함께 발현됨으로 affinity chromatography를 이용하여 불활성 상태의 30K를 90%이상의 순도로 정제한 후 희석하여 재접힘을 수행하였다. 포유동물 세포인 HeLa 세포를 대상으로 하여 재조합 30K 단백질의 에이파토시스 저해 활성을 측정하였다. 이를 위해 staurosporine을 첨가하여 HeLa 세포의 에이파토시스를 유도하고, 적정 농도의 재조합 30K 단백질을 배지에 첨가하여 에이파토시스 저해를 관찰하였다. 에이파토시스는 Heochst 염색과 flow cytometry를 이용해 분석하였다. |
| 저자 |
박혜정, 김은정, 박태현
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| 소속 |
서울대 |
| 키워드 |
Apoptosis inhibition; Recombinant 30K protein
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| E-Mail |
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| 원문파일 |
초록 보기 |
