| 초록 |
Trichloroethylene(TCE)는 지하수와 토양에서 가장 흔히 검출되는 오염물질로서 발암성 및 독성을 지니고 있다. TCE를 염소이온과 이산화탄소로 산화, 분해시키는 미생물에는 10 여종이 알려져 있으며, 이중 메탄자화균의 일종인 Methylosinus trichosporium OB3b는 다른 균주에 비해 TCE를 50 배 이상 빠른 속도로 분해할 수 있다. 그러나 이 균주의 TCE 분해 key enzyme인 sMMO가 발현 생산되기 의해서는 반드시 메탄이 존재하여야할 뿐 아니라 Cu2+의 농도가 약 1.0 M 이어야 하는 등, M. trichosporium OB3b를 실용적 목적 하에 사용하는 데에는 한계가 있다. 이러한 장애요인을 극복하기 위하여 본 연구에서는 sMMO의 구조 유전자만을 분리하여 tac promoter 하에 위치시켜 (pSMMO20의 제조) M. trichosporium OB3b보다 빠르게 성장하는 외래균주에서 발현시켰다. smmo 유전자를 도입시켜 sMMO를 발현시킨 결과 Agrobacterium tumefaciens, Rhizobium meliloti, Pseudomonas putida에서 sMMO의 활성이 관찰되었으며 기타의 균주에서는 sMMO protein의 생산은 확인되었으나 TCE분해는 관찰되지 않아 이들 sMMO protein의 활성이 없었음을 확인하였다. P. putida F1/pSMMO20 의 TCE 최대 분해속도는 약 5 nmolTCE/(min mg protein) 이었으며, M. trichosporium OB3b와 마찬가지로 chloroform도 분해하여 sMMO가 이 재조합 균주에서 발현되었음을 재차 확인하였다.
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