초록 |
본 연구에서는 국내 간척지(서산, 부안, 해남, 군산 등) 토양 및 식물체로부터 섬유소 분해활성 균주를 탐색하여 활성이 우수한 Paenibacillus polymyxa Seo3-1을 분리, 동정하여 본 균이 생산한 효소를 초본계 바이오매스의 당화에 이용하고자 하였다. 또한 본 균주의 효소생산 최적화를 위해 배양배지의 질소원과 탄소원, 초기 pH(pH 3~10), 배양온도(20~50℃), 배양시간(2~72 h) 등의 영향을 알아보았다. 그리고 효소의 기질-효소반응 최적화를 위해 반응온도(30~90℃)와 pH(pH 4~10)의 영향도 알아보았다. Cellulase 활성은 DNS 분석법을 이용하여 측정하였다. P. polymyxa Seo3-1은 탄소원으로 CMC(Carboxymethyl Cellulose), 질소원 Peptone, 배지초기 pH 7, 배양온도 40℃, 배양시간 24 h에서 가장 높은 Cellulase 활성을 보였다. 최적 배양조건에서 P. polymyxa Seo3-1이 생산한 효소는 한외여과장치(Sartorius Slice 200, 10 kD MWCO)로 10배 농축 후, 단수수버개스를 당화하는데 이용되었다. HPLC(High Performance Liquid Chromatography, Waters) 분석장치를 이용하여 단수수버개스의 섬유소(0.1 g)는 P. polymyxa Seo3-1이 생산한 효소에 의해 glucose(2.75±0.03 mg), xylose(0.79±0.08 mg), arabinose(1.12±0.05 mg)로 분해됨이 확인되었다. 향후 바이오매스의 당화율을 높이기 위해 효소의 안정적 농축 및 xylanase와의 복합효과에 대한 연구가 수행될 계획이다. |