학회 | 한국화학공학회 |
학술대회 | 2017년 가을 (10/25 ~ 10/27, 대전컨벤션센터) |
권호 | 23권 2호, p.1671 |
발표분야 | 분리기술 |
제목 | 재조합 인간상피세포성장인자(rhEGF)의 분리 정제 |
초록 | EGF는 1975년에 사람의 뇨에서 최초로 분리 되었으며 3개의 이황화 결합과 53개의 아미노산으로 구성된 단백질이다. 이단백질은 신호 전달 과정을 통하여 세포핵에 작용하여 표피세포의 분열과 증식을 촉진한다. EGF는 3개의 이황화 결합을 갖고 불용성으로, 대장균에서 고효율 발현에 대한 연구가 잘 이루어지지 않았다. EGF 유전자를 작은 유비퀴틴 관련 유전자 (small ubiquitin-related modifier gene, SUMO)와 결합하고 DE3 대장균에서 발현시켰다. IPTG (Isopropyl-β-D-Thiogalactopyranoside)로 유도하여 대장균 세포 단백질의 38.9%로 융합단백질이 발현되었고, Ni-NTA 친화성 크로마토그래피로 분리하였다. 그 후 분해효소반응으로 융합단백질에서 EGF를 얻은 후 다시 Ni-NTA 크로마토그래피로 분리 하였다. 순도 98%를 역상 HPLC에서 얻었다. |
저자 | 김인호1, 성기현2 |
소속 | 1충남대, 2삼성바이오로직스 |
키워드 | 흡착 |
원문파일 | 초록 보기 |